CRISPR/Cas系统是现代生物科学领域的一项革命性技术◈ღ，其应用已经扩展到医学◈ღ、农业d88尊龙官网手机app◈ღ、生态保护等多个领域◈ღ，相关成果和应用实例不断涌现◈ღ。CRISPR那些事儿设置一周时讯栏目◈ღ，为您带来关于CRISPR的最新研究和行业新闻◈ღ，以下是过去一周时讯的简单总结◈ღ：
研究人员在研究成年哺乳动物大脑中神经干细胞活性随衰老而降低的现象时◈ღ，对年轻和衰老小鼠的神经干细胞原代培养进行了全基因组筛选◈ღ。他们发现了300多个基因◈ღ，这些基因的敲除能够特别地恢复衰老神经干细胞的活力◈ღ。研究还发现葡萄糖代谢在这一过程中起着关键作用蜜芽地址永不失联2022◈ღ，而在所有筛选出的基因中◈ღ，最值得注意的是编码GLUT4葡萄糖转运蛋白的Slc2a4基因敲除结果◈ღ。这项研究为系统地识别和开发促进衰老神经干细胞功能的遗传干预措施提供了一个可扩展的平台◈ღ，对抗衰老过程中的再生能力下降具有重要的意义◈ღ。
Palbociclib 是一种针对细胞周期的小分子药物◈ღ，与内分泌疗法联合使用◈ღ，是激素受体 (HR) 阳性◈ღ、人类表皮生长因子受体 2 (HER2) 阴性晚期乳腺癌患者的标准治疗方法之一◈ღ。研究人员利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对乳腺癌细胞系MCF7进行全基因组敲除筛选尊龙凯时人生就是博◈ღ，◈ღ，以识别对palbociclib的耐药基因◈ღ。研究结果首次证明SEMA3F是乳腺癌对 CDK4/6 抑制剂敏感性的调节剂◈ღ。
胰腺导管腺癌(PDAC)仍然是世界范围内癌症相关死亡的主要原因尊龙凯时-人生就是搏!◈ღ，◈ღ，由于其对放疗和化疗的广泛耐药性◈ღ，治疗选择受限◈ღ，且免疫检查点阻断的单药治疗并未显示出生存益处◈ღ。将免疫调节与放疗相结合可能提供新的治疗策略蜜芽地址永不失联2022◈ღ。研究人员对人类PDAC细胞系（PANC-1, MIA PaCa-2, BxPC-3）进行了X射线和质子处理◈ღ，通过HMGB1释放量来评估免疫原性细胞死亡蜜芽地址永不失联2022◈ღ，利用免疫荧光显微镜分析细胞质中的dsDNA和dsRNA◈ღ，并使用CRISPR/Cas9敲除和抑制剂来研究STING◈ღ、MAVS和NF-kB在辐射诱导的IFNB1激活中的作用◈ღ。研究结果证实◈ღ，临床上相关的低分割X射线 Gy）能够诱导免疫原性细胞死亡基因改造◈ღ！◈ღ，并激活IFNB1和促炎细胞因子◈ღ。RNA-seq分析显示◈ღ，在3x8 Gy治疗后◈ღ，PDAC细胞中I型干扰素反应和NF-kB信号传导的整体上调◈ღ，揭示了辐射诱导的免疫原性反应受到STING尊龙凯时人生就博官网登录尊龙凯时人生就是博官网◈ღ。◈ღ、MAVS和NF-kB的调控◈ღ。
对于口腔鳞状细胞癌（OSCC）而言◈ღ，确定新的有效治疗靶点是至关重要的◈ღ。研究者们对G蛋白抑制亚基3（Gαi3）在OSCC中的表达◈ღ、潜在功能和相关机制进行了研究◈ღ。研究发现◈ღ，Gαi3在人类OSCC组织及多种OSCC细胞系中表达增加◈ღ。在不同OSCC细胞系中尊龙凯时·中国官方网站◈ღ。◈ღ，通过shRNA沉默Gαi3能显著抑制细胞增殖和迁移◈ღ，并促进细胞凋亡◈ღ。通过CRISPR/Cas9技术敲除Gαi3在OSCC细胞中产生了显著的抗肿瘤效果◈ღ。与此相反◈ღ，Gαi3的异位过表达则增强了OSCC细胞的生长能力◈ღ，促进了细胞增殖和迁移◈ღ。Gαi3在OSCC细胞中Akt-mTOR信号通路的激活中扮演着关键角色◈ღ。Gαi3的沉默或敲除导致Akt和S6K的磷酸化水平降低◈ღ，而过表达则增加了磷酸化水平◈ღ。通过Akt1的组成性活性突变体恢复Akt-mTOR信号通路的活性◈ღ，可以减轻Gαi3 shRNA诱导的抗OSCC效应◈ღ。在体内实验中◈ღ，Gαi3的沉默显著抑制了裸鼠皮下OSCC异种移植瘤的生长◈ღ，同时伴随着Akt-mTOR通路的失活和细胞凋亡的增加◈ღ。这些研究结果共同强调了Gαi3在OSCC细胞生长中的重要作用◈ღ。
CRISPR 检测虽然有效◈ღ，但由于依赖于单链核酸荧光报告基因的反式切割蜜芽地址永不失联2022◈ღ，因此存在信号转导效率低◈ღ、灵敏度有限和稳定性差的问题◈ღ。我国研究人员展示了CrisprAIE◈ღ，它利用聚集诱导发射荧光改进了 CRISPR-Cas 诊断◈ღ。这提高了在不进行扩增的情况下检测 SARS-CoV-2 等病毒的灵敏度◈ღ。将其与球形核酸和便携式设备相结合◈ღ，可将灵敏度提高 270 倍◈ღ，从而提供一种可扩展的高性能诊断方法◈ღ。
CRISPR/Cas12a技术以其在特异性DNA切割后随机切割周围非特异性单链DNA分子的能力◈ღ，在核酸检测（NAT）领域带来了革命性的变化◈ღ。虽然传统方法需要RNA预扩增◈ღ，但研究人员利用由Cas12a酶和拆分crRNA组成的分裂Cas12a系统（SCas12a）d88尊龙官网手机app◈ღ，开发了一种快速◈ღ、高灵敏度◈ღ、无需扩增的荧光和横向流动NAT检测方法◈ღ，适用于检测没有复杂二级结构的miRNA和长RNA◈ღ。SCas12a系统已成功用于量化宫颈癌患者血浆中的miR-21生物标志物◈ღ，并与RPA技术结合使用蜜芽地址永不失联2022◈ღ，能在临床样本中检测到阿托摩尔水平的HPV◈ღ。这项研究提供了一个基于SCas12a的简单且经济高效的NAT平台◈ღ，适用于各种诊断环境◈ღ。
Prime编辑（PE）技术虽然在基因组编辑领域取得了进展◈ღ，但其在引入短序列变化时的效率不一致◈ღ，尤其在poly-T序列环境中尊龙凯时 - 人生就是搏!◈ღ，◈ღ。为了解决这一问题◈ღ，研究人员开发了扩展Prime编辑（exPE）技术◈ღ，理论上能够进行任何精确的基因组编辑◈ღ。exPE利用RNA聚合酶II（Pol II）启动子驱动的扩展PE向导RNA（expegRNA）d88尊龙官网手机app◈ღ，显著提高了编辑效率◈ღ，并克服了poly-T序列的挑战◈ღ。与传统PE相比◈ღ，exPE在碱基转换和短插入的效率上提升了14倍d88尊龙官网手机app◈ღ，而在poly-T序列区域的编辑效率更是提升了259倍◈ღ。exPE技术还能将大型DNA片段无缝整合入基因组◈ღ，可能纠正约90%的人类遗传变异d88尊龙官网手机app◈ღ，极大地扩展了其在遗传学研究和治疗上的应用范围◈ღ。
研究人员之前开发了一种腺相关病毒 (AAV) Cas9 基因疗法◈ღ，用于治疗 Angelman 综合征◈ღ，该疗法整合到基因组中并过早终止Ube3a-ATS◈ღ。此次研究则评估了另外三种含有金黄色葡萄球菌Cas9的 AAV 载体在体外和体内的性能◈ღ，以及二十五种含有脑膜炎球菌Cas9的载体在体外的性能◈ღ，它们全部靶向Ube3a-ATS内的单个位点◈ღ。研究结果证明◈ღ，多靶点CRISPR gRNA 载体比单靶点载体更能有效降低 Angelman 综合征的 Ube3a-ATS 表达◈ღ。AAV 整合占主导地位（67-89%）◈ღ，polyA 和反向启动子元件使转录减少高达 50%◈ღ。这表明载体元件和靶位点数量显著影响基因编辑结果◈ღ。
急性髓系白血病（AML）是一种造血干细胞和祖细胞（HSPC）分化异常的恶性肿瘤◈ღ。虽然嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞疗法能够靶向AML细胞◈ღ，但它们也可能攻击表达相同抗原的正常细胞◈ღ，引起严重的非靶向毒性◈ღ。研究人员利用碱基编辑器BE和先导编辑PE（Prime Editing）技术◈ღ，通过基因定点突变修改HSPC上的CD123表位◈ღ，以保护健康细胞不受CAR-T细胞毒性的影响◈ღ，同时保持其正常功能◈ღ。通过优化编辑过程◈ღ，研究人员将HSPC的编辑效率从5.9%提高到78.9%◈ღ。这些经过表位修饰的细胞对CAR-T细胞的裂解具有抵抗力◈ღ，同时保留了正常的分化和功能◈ღ。此外◈ღ，将BE或PE编辑的HSPC注入人源化小鼠体内◈ღ，能够赋予髓系细胞对CAR-T免疫疗法的选择性抗性◈ღ，为治疗复发性AML提供了一种概念验证策略◈ღ。
1◈ღ、ERS Genomics Limited （ERS） 已与蒙特利尔大学签署 CRISPR/Cas9 许可协议d88尊龙官网手机app尊龙登录入口◈ღ，◈ღ，许可协议授予蒙特利尔大学（UdeM） 使用 CRISPR 基因编辑技术的权利◈ღ，包括在 UdeM 的免疫学和癌症研究所推出两个 CRISPR/Cas9 筛选设施平台◈ღ。这将扩大研究界对全基因组 CRISPR 筛选和合作范围◈ღ，旨在确定新的治疗靶点◈ღ。该协议的财务细节尚未披露◈ღ。
3◈ღ、Prime Medicine宣布与百时美施贵宝达成战略研究合作和许可协议◈ღ，以开发用于下一代体外 T 细胞疗法的试剂◈ღ。根据协议条款◈ღ，Prime Medicine 将针对选定的靶标设计优化的 Prime Editor 试剂◈ღ。同时◈ღ，百时美施贵宝将负责下一代细胞疗法的开发d88尊龙官网手机appd88尊龙官网手机app◈ღ、制造和商业化◈ღ，Prime Medicine 将提供基因编辑策略和试剂开发方面的支持◈ღ。
